O microscópio é um
instrumento que possui lentes especiais destinadas a ampliar a visualização de
um determinado objeto de tamanho reduzido que dificilmente seria possível à
observação a olho nu. Geralmente é composto por duas lentes, sendo que esse é bastante
difundido em laboratórios biológicos e também escolares. A capacidade de
ampliação varia de duas a cem vezes a forma real do objeto em observação. Em
1590 Hans
Janssen inventa o primeiro
microscópio, que inicialmente possuía apenas uma lente. Algum tempo após a
invenção, Antony van Leeuwenhoek,
fazendo observações no aparelho, constatou a presença dos glóbulos vermelhos no
sangue, um avanço para a biologia celular. O nome microscópio (mikrós, pequeno, e skoppéoo,
observar, ver através de). Abaixo você poderá conhecer alguns tipos de
microscópios existentes.
Microscópio utilizado por Anton van Leewenhoek
Microscópio utilizado por Robert Hooke para observar
células da cortiça
Microscópio Óptico (Luz)
É um
instrumento usado para ampliar, com uma série de lentes, estruturas pequenas
impossíveis de visualizar a olho nu. É constituído por um componente mecânico
que suporta e permite controlar um componente óptico que amplia as imagens. No
microscópio ótico, a luz que chega aos nossos olhos para formar a imagem,
atravessa primeiro o objeto em estudo. Por isto, o material a ser observado não
pode ser opaco.
Microscópio óptico (de luz)
Resolução Microscópio óptico
(de luz)
Microscópio de Fluorescência Comum
Certas substancia
gozam da propriedade de emitir luz quando excitadas por radiações de certos
comprimentos de ondas (normalmente ultravioleta), podendo combinar-se a certas
substancias presentes nas células permitindo a localização de determinadas
estruturas. A aplicação destas substancias como corantes estão hoje, estão
fortemente ligados com métodos imunocitoquimicos, os quais permitem localizar e
quantificar o caminho percorrido de moléculas específicas dentro do tecido em
questão. A técnica usa agentes químicos que emitem luz visível que pode ser
verde, laranjada ou vermelho. Uma vantagem da microscopia de fluorescência é
que podem ser aplicados a células vivas para se determinar a concentração
intracelular de íons de Ca+ e H+ podendo ser utilizado como forma de monitoria
do pH de células vivas.
Microscópio de Fluorescência
Resolução Microscópio
de Fluorescência
Microscópio de Fluorescência Confocal
No microscópio confocal, a
iluminação é feita por um feixe delgado de raios laser, que varre o corte
iluminado, ponto por ponto, em determinado ponto da célula, realizando um
verdadeiro “corte óptico”. Geralmente, as células são submetidas a um composto
fluorescente e a luz emitida é processada num computador, que envia sinais para
formação da imagem na tela de um monitor de vídeo.
Microscopia Confocal
Resolução Microscopia
Confocal
Microscópio
de Contraste de Fase e Interferência de Nomarski
O método do contraste
de fase é muito bem aplicado na visualização de características estruturais
muito sutis e células únicas contidas em espécimes muito finos (< 5 µm) e
não coloridos, que são muito pobres em contraste.
Microscópio
de Contraste de Fase e Interferência de Nomarski
Imagem
com contraste de fase de uma célula cultivada do cérebro de um rato
Microscópio
óptico de polarização
É utilizado na observação de
materiais que sejam birrefringentes (estruturas anisotrópicas, com índices
diferentes de refração como músculo, ossos, celulose, fibras, cabelos,
cristais, etc.). O microscópio de polarização possui dois prismas: um
polarizador e outro analisador. A luz ao penetrar em estruturas como as citadas
se desdobram em duas. As estruturas birrefringentes (anisotrópicas) produzirão
um tipo de vibração luminosa que passará, ficando brilhante. Somente as
estruturas birrefringentes aparecerão brilhantes, ficando o restante do
material escuro.
Microscópio
óptico de polarização
Resolução Microscópio óptico
de polarização
Microscópio
Confocal Laser
Possui uma série de
peculiaridades que prime observar material espesso, sem corar, vivo ou não,
pois focaliza diferentes planos focais, obtendo-se cortes ópticos. Ele
trabalha, geralmente, com o mesmo tipo de sistema óptico usado pela
florescência convencional, com a diferença que neste, todo o campo fica
iluminado enquanto que no LSM, o sistema óptico focaliza somente um ponto em
determinada profundidade no espécimen. Uma fonte luminosa bastante forte e
brilhante é requerida e desse modo usa-se o laser.
Microscópio láser confocal
LSM 700
A luz laser
difere da luz comum, pois seu espectro de cores é mais reduzido e suas ondas
luminosas oscilam todas em forma sincrônica.
Microscópio Eletrônico de Transmissão
Um
microscópio eletrônico de transmissão (MET) é uma técnica de microscopia na
qual um feixe de elétrons é emitido em direção a uma amostra ultra fina,
interagindo com a amostra enquanto a atravessa. A interação dos elétrons
transmitidos através da amostra forma uma imagem que é ampliada e focada em um
dispositivo de imagem, como uma tela fluorescente em uma camada de filme
fotográfico, ou detectada por um sensor como uma câmera CCD. Um MET é capaz de exibir imagens a uma resolução
significativamente maior em comparação com os microscópios óticos devido ao
pequeno comprimento de onda dos elétrons.
O primeiro
MET, originalmente instalado no I.G. Farben-Werke e agora em exposição no
Deutsches Museum em Munique, Alemanha.
Uma
imagem obtida a partir do MET. O vírus da poliomelite mede 30 nm.
O
aperfeiçoamento dos microscópios determinou um aumento no volume de obras sobre
investigações, usando os recursos da microscopia, e gradativamente, o homem foi
desvendando os mistérios das células. Com base nesse estudo microscópios são equipamentos fundamentais em
pesquisas microbiológicas desenvolvendo um grande papel. Com grande capacidade
de aumento dependendo seu tipo e lentes usadas. Cada um tem uma função de
grande importância fazendo com seu funcionamento seja de grande eficácia.
Referências:
Trabalho feito pelos alunos(as):
Cláudio Henrique
Lara Monique
Mariele Sousa
Paulo Moura
Rosiléia Silva
Rosiléia Silva
Professor: Carlos
Eduardo Estêves de Paula
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